产品货号:
YTB4651
中文名称:
一步法SDS-PAGE胶超快速制备试剂盒(6%)
英文名称:
One-step SDS-PAGE Gel Super Quick Preparation Kit,6%
产品规格:
125T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本试剂盒提供了简单而又超快速地配制相应浓度SDS-PAGE凝胶所需的所有试剂,用户只需自备制胶器具和蒸馏水,即可配制Tris-HCl缓冲系统的6%浓度的SDS-PAGE凝胶。
本系列产品的上层胶浓度为4%,下层胶有6%、8%、10%、12%和15%共5种常见浓度供您选择,也可以考虑选购可以配制各种不同浓度SDS-PAGE凝胶的一步法SDS-PAGE胶快速制备试剂盒(货号:YTB4643)。
- 本试剂盒使用便捷。本试剂盒将SDS-PAGE凝胶配制所需试剂混合成下层胶预混液和上层胶预混液,使用前仅需加入适量10%凝胶聚合催化剂和TEMED,混匀后即可灌胶。
- 本试剂盒使用一步法配胶,快速高效。本试剂盒优化了配方,灌注下层胶(即分离胶)后,无需液封可直接加入上层胶(又称浓缩胶、堆积胶或积层胶),一步完成制胶,节约配胶时间。
- 本试剂盒上层胶为红色,指示清晰。本试剂盒的SDS-PAGE一步法红色上层胶预混液含电泳时无迁移红色染料,可使蛋白上样孔一目了然,便于上样,且易于判断上样孔是否歪曲或破损。该红色染料可以稳定存在于上层胶中,不会随着电泳进入下层胶,不影响电泳和染色效果,有助于电泳后辨别并切除上层胶,便于后续转膜等实验的进行。
- 本试剂盒配制的SDS-PAGE凝胶,具有优良的分离效果。电泳后蛋白条带平整、清晰、细腻、锐利,特别是小分子蛋白质条带更清晰。
组分 | 规格 |
6% SDS-PAGE一步法下层胶预混液 | 500mL |
SDS-PAGE一步法红色上层胶预混液 | 125mL |
凝胶聚合催化剂 | 1g |
TEMED | 1mL |
保存:2~8℃,有效期1年。
本试剂盒约可配制125块厚度为0.75mm的常规大小SDS-PAGE胶(也称mini胶)。具体可以配制的凝胶数量和凝胶的厚薄以及凝胶的大小有关。
- 两种预混液及TEMED均需4℃避光保存。凝胶聚合催化剂更宜室温保存,4℃保存时需拧紧瓶盖注意防潮,受潮后会很快失效。凝胶聚合催化剂用水配制成10%溶液后,分装成小管-20℃保存,通常半年内有效。
- 凝胶聚合催化剂配制成10%溶液后,应当-20℃保存,推荐使用超纯水配制。同时应尽量减少室温存放时间,以防失效。凝胶聚合催化剂每次应适量配制,并尽量使用新鲜配制的10%凝胶聚合催化剂溶液。超纯水推荐使用无菌超纯水(货号:YT999)。
- SDS-PAGE一步法红色上层胶预混液长期静置后染料可能会出现沉淀,不影响正常使用,使用前请摇晃均匀。
- TEMED易挥发,使用后请盖紧瓶盖。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切,可通过适当调节凝胶聚合催化剂和TEMED的用量,控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。
- 下层胶预混液和上层胶预混液中含有Acr-Bis,对人体有毒,操作时请特别小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
- TEMED易燃,有腐蚀性,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或腐蚀其它物品。
- 根据目的蛋白的分子量大小选择合适浓度的SDS-PAGE下层胶(即分离胶)。
不同浓度的SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围如下:SDS-PAGE分离胶浓度 最佳分离范围 6%胶 50~150kDa 8%胶 30~90kDa 10%胶 20~80kDa 12%胶 12~60kDa 15%胶 10~40kDa - 称取适量凝胶聚合催化剂,用超纯水或其它高纯度的水配制10%凝胶聚合催化剂溶液。例如称取0.1g凝胶聚合催化剂,用超纯水溶解并定容到1mL,即为10%凝胶聚合催化剂溶液。
注:凝胶聚合催化剂溶液容易失效,建议分装后置于-20℃保存,通常半年内有效。超纯水推荐使用无菌超纯水(货号:YT999)。 - 配制一块常用PAGE胶(胶板宽度为10厘米)所需下层胶和上层胶体积(下层胶按6厘米高度计算,上层胶按1.5厘米高度计算,均含约0.3mL的冗余量)参见下表。
凝胶厚度 下层胶体积 上层胶体积 0.75mm 4.0mL 1.0mL 1.0mm 5.4mL 1.5mL 1.5mm 8.0mL 2.0mL
注:下层胶体积已包含适量冗余,请勿全部用于灌制下层胶,以免灌胶时上层胶高度不够。 - 参考下表,在相应浓度的SDS-PAGE下层胶预混液中,按照1%的比例加入相应量的10%凝胶聚合催化剂溶液,按照0.04%的比例加入相应量的TEMED。例如10mL 10% SDS-PAGE一步法下层胶预混液中,加入100μL 10%凝胶聚合催化剂溶液和4μL TEMED。适当混匀后倒入到制胶模具中,无须等待下层胶凝固,可直接注入配制好的上层胶混合液。也可以用蒸馏水或异丙醇封住液面,直至下层胶充分凝固,通常10~30分钟内胶会凝固。
注:具体的凝固时间和温度及光照有关,说明书中10%凝胶聚合催化剂和TEMED的推荐用量是室温为25℃时的用量。为达到与25℃时相近的凝固时间,当室温低于25℃时,可以适当同时加大10%凝胶聚合催化剂和TEMED的用量,例如20℃时建议用量是正常推荐用量的1.5倍,15℃时建议用量是正常推荐用量的2倍。成分 配制不同体积SDS-PAGE下层胶所需各成分的体积(mL) SDS-PAGE一步法下层胶预混液 5 10 15 20 30 50 10%凝胶聚合催化剂溶液 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5 TEMED 0.002 0.004 0.008 0.008 0.012 0.02 - 参考下表,在SDS-PAGE一步法红色上层胶预混液中,按照1%的比例加入相应量的10%凝胶聚合催化剂溶液,按照0.1%的比例加入相应量的TEMED。例如10mL SDS-PAGE一步法红色上层胶预混液中,加入100μL 10%凝胶聚合催化剂溶液和10μL TEMED,适当混匀。可在下层胶灌注后,直接将配制好的SDS-PAGE一步法红色上层胶预混液紧贴玻璃板均匀轻柔注入到下层胶上,随后小心插入梳子等待凝固。
如果进行了液封,需去除下层胶上面覆盖的液体,尽量去干净,然后倒入配制好的SDS-PAGE一步法上层胶预混液,插入梳子等待凝固。待上层胶凝固后,即可进行后续的电泳实验。
注1:SDS-PAGE一步法红色上层胶预混液使用前须摇匀。
注2:一步法直接加入上层胶混合液时一定要轻缓并左右平移加入,而不是集中在一个位置灌制,以免上层胶溶液冲入下层胶而破坏上下层胶分界线的平整度,建议使用1mL移液器缓慢、均匀、左右平移加入。
注3:一步法直接加入上层胶混合液,上下层胶分界线的平整度可能会稍差于液封法,但不影响后续电泳结果。成分 配制不同体积SDS-PAGE上层胶所需各成分的体积(mL) SDS-PAGE一步法红色上层胶预混液 2 3 4 6 8 10 10%凝胶聚合催化剂溶液 0.02 0.03 0.04 0.06 0.08 0.1 TEMED 0.002 0.003 0.004 0.006 0.008 0.01 - 配制好的凝胶如果当天不能使用,可在4℃保存1~2天后使用,但通常新鲜配制凝胶的电泳效果更佳。
相关搜索:一步法SDS-PAGE胶超快速制备试剂盒(6%),SDS-PAGE胶配制